可見分光光度計已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸、蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。基本原理：分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團(tuán)的信息，可以用標(biāo)準(zhǔn)光譜圖再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析。朗伯-比爾定律：當(dāng)一束平行單色光通過含有吸光物質(zhì)的稀溶液時，溶液的吸光度與吸光物質(zhì)濃度、液層厚度乘積成正比，即A=kcl式中比例常數(shù)k與吸光物質(zhì)的本性，入射光波長及溫度等因素有關(guān)。c為吸光物質(zhì)濃度，l為透光液層厚度。

　　可見分光光度計正常工作的環(huán)境要求如下：

　?。?）避開高溫高濕環(huán)境。請不要將儀器安裝在高溫高濕的環(huán)境下。儀器必須在5℃~35℃度溫度、≤85%的濕度條件下安裝使用。

　?。?）避免儀器受外界磁場干擾。請盡量遠(yuǎn)離發(fā)出磁場、電場、高頻波的電器裝置。

　?。?）遠(yuǎn)離腐蝕氣體。請不要將儀器安裝在空氣中氯氣、鹽酸氣體、硫化氫氣體、亞硫酸氣體等腐蝕性氣體超標(biāo)場所。

　　（4）儀器應(yīng)放置在穩(wěn)定的工作臺上。放置儀器的工作臺應(yīng)水平、穩(wěn)定、不能有振動；儀器的風(fēng)扇附近應(yīng)留有足夠的空間，使其排風(fēng)順暢。

　?。?）不要與其他用電設(shè)備共用電源插座。請為儀器單獨設(shè)計一個電源插座，不要與其它用電設(shè)備共用，電源應(yīng)具備保護(hù)地線。

　?。?）不要將儀器放置在陽光直接照射的地方。

　　（7）避免灰塵多環(huán)境。

　　可見分光光度計的使用方法：

　　1、在接通電源之前，電表的指針必須位于“0”刻線上，否則應(yīng)旋動電表上的校正螺絲調(diào)節(jié)到位。

　　2、打開比色皿室的箱蓋和電源開關(guān)，使光電管在無光照射的情況下預(yù)熱15分鐘以上。

　　3、旋轉(zhuǎn)波長調(diào)節(jié)器，選擇測定所需的單色光波長。選擇適當(dāng)?shù)撵`敏度，一般先將靈敏度旋鈕至中間位置，用零點調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)電表指針至T值為0%處。若不能調(diào)到，應(yīng)適當(dāng)增加靈敏度。

　　4、放入空白溶液和待測溶液，使空白溶液置于光路中，蓋上比色皿室箱蓋，使光電管受光，調(diào)節(jié)光量調(diào)節(jié)旋鈕使電表指針在T值為100%處。

　　5、打開比色皿室箱蓋（關(guān)閉光門），調(diào)節(jié)零點調(diào)節(jié)旋鈕使針在T值為0%處，然后蓋上箱蓋（打開光門），調(diào)節(jié)光量調(diào)節(jié)旋鈕使指針在T值為100%處。如此反復(fù)調(diào)節(jié)，直到關(guān)閉光t0=ITI門進(jìn)和打開光門時指針分別指在T值為0%和100%處為止。

　　6、將待測溶液置于光路中，蓋上箱蓋，由此時指針的位置讀得待測溶液的T值或A值。

　　7、測量完畢后，關(guān)閉開關(guān)取下電源插頭，取出比色皿洗凈擦干，放好。蓋好比色皿暗箱，蓋好儀器。